Zastosowanie dwuchlorowodorku kwasu 3,5-dwuaminobenzoesowego do fluorymetrycznej identyfikacji DNA limfocytów ludzkich w alkalicznym gradiencie gęstości sacharozy
Oglądaj/ Otwórz
Data
1981Autor
Rózga, Błażej
Koceva-Chyła, Anata
Poziomska, Elżbieta
Tranda, Tadeusz
Leyko, Wanda
Metadata
Pokaż pełny rekordStreszczenie
The fluorimetrio method with DABA x 2HC1 was applied in the work in localizlng
the DNA in fractions of alkaline sucrose density gradient. The human lymphocytes used in the experiments were exclted towards the blastic transformation
wlth phitohemaglutinine (PHA+), the unexoitated human lymphocytes
(PHA-) and the commercise samcle of DNA izola ted frora the calf thymus (Sigma
Chem. Co) were also usod. The obtalned data show that the results of the
fluorimetric assay of the human lymphocytes DNA using the DABA x 2HCl in the
fractions of the sucrose density gradient are in agreement with results
obtained using the radioizotope method,' both for the unirradiated as well
as for irradiated lymphocytes, and that this method might be used in the
estimations of the molecular weight of the DNA using the centrifugation
method in the sucrose density gradients without previous labelling of the
cells. In der vorliegenen Arbeit verwendete man die fluorymetrischen Methoden
aus DABA x 2HCl zur Bezeichnung der DNS-Lokalisierung in den Fraktionen des
alkalischen Gradients der Dichtigkeit der Sacharose. Man gebrauchte die menschlichen
Lymphocyten, die zur blastlschen Transformation mit Hilfe von Fitohemaglutyninum
(PHA+) angeregt wurden, diś nicht angeregten menschlichen
Lymphozyten (PHA-) und das geziichtete Praparat der DNS des Kalbsthymus. (Sigma
Chem. Co). Die gewonnen Angaben zeigten, dass die Ergebnisse der fluorymetrischen
Kennzeichnung DNS der menschlichen Lymphocyten bei der Verwendung
von DABA x 2HC1 in den Fraktionendes alkalischen Gradients der Dichtigkeit
von Sacharose mit den Ergebnissen, die mit Hilfe der radioizotopischen Methode
iibereinstimmen, sowohl im Fali der bestrahlten Lymphozyten ais auch
der unbestrahlen. Diese Methode kann bei den Untersuchungen der Masse von
Molekiilen der DNS mit Hilfe des Wirbelins in den Gradienten der Dichtigkeit
der Sacharose verwendet werden,, ohne die Notwendichkeit der friiheren Kennzeichnung
der Zellen.