Pulse-polarographic characteristic of DNA modified by organophosphorus insecticides in vitro

Abstract

Przeprowadzono badania metodą puls-polarograficzną DNA izolowanego z grasicy cielęcia i zmodyfikowanego związkami fosforoorganicznymi. Zbadano wpływ następujących związków: malationu (0,0-dimetylo-S-1-2-dikarboetoksyetyloditiofosforanu), DDVP (0,0-dimetylo-0-1-2-dichlorowinylofosforanu), metyloparationu (0,0-dimetylo-0-4-nitrofenylotionofosforanu) i metylobromfenwinfosu (0,0-dimetylo- 0-1-2,4-dichlorofenylo-2-bromowinylofosforanu). Zaobserwowano zmiany własności pulspolarograficznych po inkubacji dwuniciowego DNA ze związkami fosforoorganicznymi. Zmiany dotyczyły szczytu II i III. Szczyt II jest charakterystyczny dla dwuniciowego DNA i jest wywołany niewielkimi zaburzeniami helikalnej struktury. Szczyt III jest charakterystyczny dla jednoniciowego DNA. Po 72-godzinnej inkubacji z malationem, metyloparationem lub metylobromfenwinfosem szczyt III odpowiadał 2-3% zawartości jednoniciowego DNA w odniesieniu do zdenaturowanego termicznie DNA jako wzorca. Pomiary w pH 5 wykazały różnice w kinetyce zmian dwuniciowego DNA między DDVP i innymi badanymi insektycydami. Zmiany strukturalne DNA wywołane przez malation, metyloparation i metylobromfenwinfos były bardzo nieznaczne. Obserwowano zmiany w zakresie temperatur przedtopnieniowych (30-60°c). Polarograficzne pomiary przeprowadzone po termicznej denaturacji dwuniciowego DNA, zmodyfikowanego uprzednio związkami fosforoorganicznymi, wykazywały obecność regionów termolabilnych.